Cryosurvival of goat spermatozoa in tris coconut milk extender supplemented with vitamin B6

Abstract

To maintain sperm for longer periods and cryopreserve semen, dilution with a protective extender is necessary in order to maintain fertilizing capacity of spermatozoa during in vitro storage at low temperatures. The effect of vitamin B6 in the extender of cryopreserved semen obtained from West African Dwarf bucks was studied. Pooled semen was diluted in 100ML tris coconut milk based extender supplemented with 0, 2, 4, 6 and 8mM of vitamin B6. The diluted semen samples were cryopreserved for 30 days and thereafter evaluated for sperm quality. Following cryopreservation, acrosome reaction and capacitation of spermatozoa were induced in vitro. The results showed higher (P<0.05) spermatozoa motility, acrosome integrity, membrane integrity and live sperm in extenders supplemented with vitamin B6 compared to the control group. Motility was better sustained at all levels of vitamin B6 inclusions, acrosome integrity and membrane integrity were better sustained in extender supplemented with 8mM inclusion levels of vitamin B6 (P<0.05). Lower (P<0.05) concentrations of malondialdehyde (MDA) and leukocytes in extender supplemented with vitamin B6 were observed. The extenders supplemented with vitamin B6 had the highest (P<0.05) values of arginase activity at 8mM inclusion. More spermatozoa cryopreserved with vitamin B6 underwent acrosome reaction and capacitation compared to the control (P < 0.05) and other level of inclusion. Although a suitable supplementary level of vitamin B6 in semen extender for one of the functional parameters of the cryopreserved buck sperm may not necessarily be the best supplementary level for the other sperm functions, the findings indicated that supplementation of semen extender with vitamin B6 improved the quality of cryopreserved spermatozoa of West African dwarf bucks.

La cryoconservation du sperme est une technique essentielle pour la reproduction animale, permettant la conservation à long terme du matériel génétique de haute valeur. Afin de maintenir la capacité fécondante des spermatozoïdes pendant le stockage in vitro à basse température, une dilution avec un milieu de conservation protecteur s’avère nécessaire. Cette étude examine l’effet de la vitamine B6 sur la qualité des spermatozoïdes de boucs West African Dwarf cryoconservés. Le sperme collecté a été dilué dans un milieu à base de lait de coco enrichi en Tris (100 mL) et supplémenté en vitamine B6 à différentes concentrations (0, 2, 4, 6 et 8 mM). Les échantillons dilués ont été cryoconservés pendant 30 jours avant d’être évalués pour leur qualité spermatique. La réaction acrosomique et la capacitation des spermatozoïdes ont été induites in vitro après la cryoconservation. Les résultats ont démontré une amélioration significative (p < 0,05) de la motilité, de l’intégrité acrosomique et membranaire des spermatozoïdes, ainsi que de la proportion de spermatozoïdes vivants dans les milieux supplémentés en vitamine B6 par rapport au groupe témoin. La motilité spermatique était maintenue de manière optimale à toutes les concentrations de vitamine B6 testées. L’intégrité acrosomique et membranaire était quant à elle mieux préservée dans le milieu enrichi à 8 mM de vitamine B6 (p < 0,05). De plus, les concentrations de malondialdehyde (MDA) et de leucocytes étaient significativement plus faibles (p < 0,05) dans les milieux supplémentés en vitamine B6. Ces mêmes milieux ont également présenté les valeurs les plus élevées d’activité arginasique (p < 0,05) à la concentration de 8 mM. Enfin, un taux plus important de spermatozoïdes cryoconservés avec de la vitamine B6 a subi une réaction acrosomique et une capacitation comparativement au groupe témoin (p < 0,05) et aux autres concentrations testées. En conclusion, bien qu’un niveau optimal de supplémentation en vitamine B6 puisse varier selon les paramètres fonctionnels étudiés, cette étude démontre que l’ajout de vitamine B6 au milieu de dilution améliore globalement la qualité des spermatozoïdes cryoconservés de boucs West African Dwarf.